大腸桿菌在表達(dá)蛋白過(guò)程中越來(lái)越少？

大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)是目前應(yīng)用*泛地蛋白表達(dá)系統(tǒng)。它具有：遺傳背景清楚；易于培養(yǎng)和控制；轉(zhuǎn)化操作簡(jiǎn)單；表達(dá)水平高；成本低；周期短等特點(diǎn)。同時(shí)是常用也是經(jīng)濟(jì)實(shí)惠的蛋白表達(dá)系統(tǒng)，在基因表達(dá)技術(shù)中發(fā)展最早。

主要可能有兩種原因，一種是大腸在加入IPTG等誘導(dǎo)劑后大腸停止生長(zhǎng)或者裂解，這時(shí)候我們要考慮蛋白本身對(duì)該菌是有一定毒性的，這時(shí)候我們可以選擇一些采用嚴(yán)緊控制的宿主菌株，比如帶有pLysS的菌株。另外一種原因就是很令人頭疼的了，當(dāng)我們發(fā)現(xiàn)出現(xiàn)大面積搖瓶中細(xì)菌量逐漸降低甚至培養(yǎng)基回復(fù)到澄清狀態(tài)，就應(yīng)該懷疑噬菌體污染的可能性了。