蛋白表達的幾種常用標(biāo)簽介紹

　　蛋白表達方法對于能否及時獲取所需數(shù)量和質(zhì)量的重z組蛋白非常關(guān)鍵。選擇了錯誤的表達宿主可能導(dǎo)致蛋白質(zhì)錯誤折疊或低量表達.缺少必要的翻譯后修飾或不適當(dāng)?shù)男揎?。選擇表達系統(tǒng)時需騎慮的因素包括蛋白質(zhì)的大小、二硫鍵的數(shù)目、所需翻譯后修飾的類型及目標(biāo)蛋自質(zhì)的定位。
 

　　蛋白表達的幾種常用標(biāo)簽介紹：
 

　　GST(谷胱甘肽巰基轉(zhuǎn)移酶) 標(biāo)簽蛋白本身是一個在解毒過程中起到重要作用的轉(zhuǎn)移酶，它的天然大小為26KD。將它應(yīng)用在原核表達的原因大致有兩個，一是因為它是一個高度可溶的蛋白，希望可以利用它增加外源蛋白的可溶性；另一個是它可以在大腸桿菌中大量表達，起到提高表達量的作用。
 

　　His6是指六個組氨酸殘基組成的融合標(biāo)簽，可插入在目的蛋白的C末端或N末端。當(dāng)某一個標(biāo)簽的使用，一是能構(gòu)成表位利于純化和檢測；二是構(gòu)成結(jié)構(gòu)特征(結(jié)合配體)利于純化。組氨酸殘基側(cè)鏈與固態(tài)的鎳有強烈的吸引力，可用于固定化金屬螯合層析(IMAC)，對重組蛋白進行分離純化。
 

　　MBP(麥芽糖結(jié)合蛋白)標(biāo)簽蛋白大小為40kDa，由大腸桿菌K12的malE基因編碼。MBP可增加在細菌中過量表達的融合蛋白的溶解性，尤其是真核蛋白。MBP標(biāo)簽可通過免疫分析很方便地檢測。有必要用位點專一的蛋白酶切割標(biāo)簽。如果蛋白在細菌中表達，MBP可以融合在蛋白的N端或C端。
 

　　Flag標(biāo)簽蛋白為編碼8個氨基酸的親水性多肽(DYKDDDDK)，同時載體中構(gòu)建的Kozak序列使得帶有FLAG的融合蛋白在真核表達系統(tǒng)中表達效率更高。
 

　　SUMO標(biāo)簽蛋白是一種小分子泛素樣修飾蛋白(Small ubiquitin-likemodifier)，是泛素(ubiquitin)類多肽鏈超家族的重要成員之一。