單克隆抗體的純化——艾柏森生物

單克隆抗體的純化是一個關鍵步驟，確保抗體的高純度和活性。以下是一般性的單克隆抗體純化流程：

細胞培養(yǎng)： 單克隆抗體通常是從哺乳動物細胞或其他表達系統(tǒng)中生產的。首先，需要進行細胞培養(yǎng)，以產生抗體。

收集培養(yǎng)上清液： 抗體通常以分泌的形式存在于培養(yǎng)上清液中。上清液是通過離心來去除細胞碎片和細胞殘渣，然后收集清液以進行后續(xù)處理。

蛋白A親和層析： 蛋白A是一種常用的親和層析介質，用于純化大多數(shù)IgG類型的抗體。抗體可以與蛋白A結合，而其他污染物則不會結合，因此可以通過洗脫步驟來純化抗體。

離子交換層析： 如果需要進一步提高純度，可以使用離子交換層析來去除殘留的污染物和其他蛋白質。通過調節(jié)鹽濃度和pH值，可以選擇性地洗脫抗體。

尺寸排除層析： 這是一個常用的步驟，用于進一步去除任何殘留的雜質，如聚集物或碎片。尺寸排除層析根據分子大小將溶液分離，較大的分子會被排除，而較小的單克隆抗體則通過。

濃縮和 buffer exchange： 在純化的最后階段，抗體可以被濃縮，并且可以進行緩沖液的交換，以適應后續(xù)的實驗或應用。

純化后的分析： 純化后的抗體需要進行質量分析，包括濃度測定、純度分析、功能測試等，以確保其適用于預期的應用。

以上步驟是單克隆抗體純化的一般流程，具體操作可能會因實驗目的、抗體類型和純化系統(tǒng)的不同而有所變化。