單克隆抗體制備技術(shù)的應(yīng)用案例

　　單克隆抗體制備是相對(duì)于多克隆抗體而言的。單克隆抗體指由單一的漿細(xì)胞克隆所產(chǎn)生的高度均一、僅針對(duì)某一抗原表位的抗體。當(dāng)機(jī)體受到抗原刺激后，B淋巴細(xì)胞被抗原決定簇激活，增殖分化出大量的漿細(xì)胞，而后由漿細(xì)胞分泌出特異性抗體。1957年，生物學(xué)家伯內(nèi)特提出了克隆選擇學(xué)說(shuō)：動(dòng)物的每個(gè)B淋巴細(xì)胞都有其*的受體，在受到外界抗原刺激時(shí)，特定的B細(xì)胞會(huì)發(fā)生免疫反應(yīng)，迅速增殖分化產(chǎn)生相應(yīng)抗體，抵御抗原的入侵。

 

　　隨后，人們發(fā)現(xiàn)無(wú)論是在體內(nèi)的腫瘤細(xì)胞還是移植到體外培養(yǎng)的腫瘤細(xì)胞都具有無(wú)限傳代的特點(diǎn)，1975年，英國(guó)科學(xué)家將壽命長(zhǎng)但不能產(chǎn)生特異性抗體的小鼠骨髓瘤細(xì)胞與壽命短但經(jīng)免疫后可產(chǎn)生特異性抗體的漿細(xì)胞在體外進(jìn)行融合，創(chuàng)建了雜交瘤技術(shù)。該技術(shù)所產(chǎn)生的雜交瘤細(xì)胞既可以分泌我們所需的特異性抗體，又具有癌細(xì)胞無(wú)限繁殖的能力。

 

　　單克隆抗體制備技術(shù)的應(yīng)用：

　　1.檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)診斷試劑

　　作為檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室的診斷試劑，單克隆抗體以其特異性強(qiáng)、純度高、均一性好等優(yōu)點(diǎn)，廣泛應(yīng)用于酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)、放射免疫分析、免疫組化和流式細(xì)胞儀等技術(shù)。并且單克隆抗體的應(yīng)用，很大程度上促進(jìn)了商品化試劑盒的發(fā)展。應(yīng)用單克隆抗體制作的商品化試劑盒廣泛應(yīng)用于：①病原微生物抗原、抗體的檢測(cè)；②腫瘤抗原的檢測(cè)；③免疫細(xì)胞及其亞群的檢測(cè)；④激素測(cè)定；⑤細(xì)胞因子的測(cè)定。

　　2．蛋白質(zhì)的提純

　　單克隆抗體是親和層析中重要的配體。將單克隆抗體吸附在一個(gè)惰性的固相基質(zhì)上，并制備成層析柱。當(dāng)樣品流經(jīng)層析柱時(shí)，待分離的抗原可與固相的單克隆抗體發(fā)生特異性結(jié)合，其余成分不能與之結(jié)合。將層析柱充分洗脫后，改變洗脫液的離子強(qiáng)度或pH，與分離的抗原與抗體解離，收集洗脫液便可得到欲純化的抗原。

　　3．腫瘤的導(dǎo)向治療和放射免疫顯像技術(shù)

　　將針對(duì)某一腫瘤抗原的單克隆抗體與化療藥物或放療物質(zhì)連接，利用單克隆抗體的導(dǎo)向作用，將藥物或放療物質(zhì)攜帶至靶器官，直接殺傷靶細(xì)胞，稱為腫瘤導(dǎo)向治療。另外，將放射性標(biāo)記物與單克隆抗體連接，注入患者體內(nèi)可進(jìn)行放射免疫顯像，協(xié)助腫瘤的診斷。