人源化納米抗體制備

人源化納米抗體制備技術(shù)背景：

駱駝科動(dòng)物體內(nèi)會(huì)產(chǎn)生一種*的抗體：缺失輕鏈的重鏈抗體，通常把源于這種抗體的可變區(qū)片段成為納米抗體（Nanobody）；納米抗體具有高親和力和高特異性的特點(diǎn)；納米抗體為重鏈抗體的可變區(qū)部分VHH；分子量只有12~115kDa，穩(wěn)定性明顯優(yōu)于人抗體，納米抗體同樣含有三個(gè)CDR，其中CDR3對(duì)親和力起到主要作用；與人抗體的VH相比，納米抗體的CDR3更長(zhǎng)，可以形成凹凸環(huán)結(jié)構(gòu)，能夠深入抗原內(nèi)部更好的結(jié)合抗原，因而親和力更高。此外，納米抗體的FR2的疏水殘基被親水殘基取代；水溶性更好，不容易形成聚集體。

圖一：納米抗體的原理結(jié)構(gòu)示意：

人源化納米抗體制備的優(yōu)勢(shì)和應(yīng)用：

人源化納米抗體制備技術(shù)簡(jiǎn)介：

VHH和人體VH的基因同源性高達(dá)80~90%，結(jié)構(gòu)十分相似，都包含了3個(gè)高變區(qū)（HVR區(qū)）和4個(gè)骨架區(qū)（FR區(qū)）。通過(guò)比較發(fā)現(xiàn)，駱駝源VHH和人體VH之間存在微小但不容忽視的區(qū)別：它們的互補(bǔ)決定區(qū)（complementarity determining region,CDR）不同。VHH的CDR1和CDR3更長(zhǎng)。VHH的CDR3長(zhǎng)度為16-18個(gè)氨基酸，而人和小鼠的VH平均長(zhǎng)度分別為14和12個(gè)氨基酸。另外在FR2中，人或小鼠的V37、G44、L45和W47這四個(gè)氨基酸殘基是疏水的，在進(jìn)化中相當(dāng)保守；在VHH中，它們突變?yōu)橛H水性的氨基酸殘基F37、E44、R45、G47。因此將人源抗體VH結(jié)構(gòu)域FR2中一些氨基酸進(jìn)行VHH特征改造，或者將VHH抗體進(jìn)行人源化改造，可以獲得更好的穩(wěn)定性、溶解性以及生物活性。

艾柏森公司服務(wù)：

艾柏森生物提供人源納米抗體以及納米抗體人源化改造服務(wù)。艾伯森生物提供基于人單域抗體骨架構(gòu)建的人單域抗體合成抗體展示文庫(kù)，針對(duì)特異性靶點(diǎn)快速篩選人源或者人源化納米抗體。另外，利用特殊的轉(zhuǎn)基因免疫系統(tǒng)人源化小鼠，通過(guò)針對(duì)免疫構(gòu)建人源免疫納米抗體庫(kù)，可以篩選到更高親和力的人源納米抗體。

人源化納米抗體制備篩選流程：