HE/化學(xué)染色

實(shí)驗(yàn)蘇木素(Hematoxylin)-伊紅(Eosin)染色法，簡(jiǎn)稱HE染色法。蘇木精染液為堿性,主要使細(xì)胞核內(nèi)
的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核酸著紫色;伊紅為酸性染料，主要使細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞外基質(zhì)中的成分著紅色。HE染
色提供良好的核漿對(duì)比染色,是細(xì)胞化學(xué)染色常用的一種方法。

實(shí)驗(yàn)步驟:
1.樣品制備:對(duì)于貼壁生長(zhǎng)細(xì)胞，胰酶消化，調(diào)整細(xì)胞濃度約1x105/ml,滴加吁蓋玻片上(置于6孔板
中)，培養(yǎng)相應(yīng)時(shí)間后，取出細(xì)胞爬片,用PBS洗滌3次
2.樣品固定: 95%Z醇固定20min，PBS洗滌2次，每次1min
3.染核:蘇木素染液染色2-3min，自來(lái)水洗滌
4.色:鏡下觀察，若細(xì)胞核染色過深,用1 %鹽酸酒精溶液分色數(shù)秒，睞水洗滌
5.染胞質(zhì):浸入伊紅染液染色1min,自來(lái)水洗滌
6.吹干或自然晾干細(xì)胞爬片后，中性樹膠封片
7.若細(xì)胞用4%多聚甲醛固定,則染色時(shí)間相應(yīng)延長(zhǎng)，蘇木素染色12-15min,伊紅5min即可