微生物內進行蛋白質表達前需要考慮的8件事

在微生物內進行蛋白質表達是生物科技中的核心技術。然而，每種蛋白質都具有其*的結構性質，比如二硫鍵（disulfidebonds）數量，是否存在疏水區域(hydrophobicregions)，是否存在跨膜區域(transmembranedomains)，是否具有糖基化(glycosylations)等翻譯后修飾過程等，所有的這些性質都可能決定著蛋白質表達過程的難易。在與目的蛋白質來源相似的宿主內表達蛋白質要相對容易些。然而，大多時候，我們需要在與蛋白質來源不同的宿主內進行蛋白...

多肽合成技術原理，多肽合成方法解讀

多肽是蛋白質水解的中間產物，是α－氨基酸以肽鍵連接在一起而形成的化合物。由兩個氨基酸分子脫水縮合而成的化合物叫做二肽，同理有n個氨基酸分子脫水縮合而成的化合物叫做n肽。通常把三肽以上的叫多肽。多肽合成以固相合成為反應原理，在密閉的防爆玻璃反應器中使氨基酸按照已知順序（序列，一般從C端-羧基端向N端-氨基端）不斷添加、反應、合成，操作終得到多肽載體。固相合成法，大大的減輕了每步產品提純的難度。為了防止副反應的發生，參加反應的氨基酸的側鏈都是保護的。羧基端是游離的，并且在反應之前...

抗體制備有關佐劑的配制講解

有了質量好的抗原，還必須選擇適當的免疫途徑，才能對抗體制備質量好（特異性強和效價高）的抗體。今天我們來看看佐劑的配制：由于不同個體對同一抗原的反應性不同，而且不同抗原產生免疫反應的能力也有強有弱，因此常常在注射抗原的同時，加入能增強抗原的抗原性物質，以刺激機體產生較強的免疫反應，這種物質稱為免疫佐劑。佐劑除了延長抗原在體內的存留時間，增加抗原刺激作用外，更主要的是，它能刺激網狀內皮系統，使參與免疫反應的免疫活性細胞增多，促進T細胞與B細胞的相互作用，從而增強機體對抗原的細胞免...

單克隆抗體的純化技術操作步驟

本文由艾柏森生物提供從培養液或腹腔積液獲得的單克隆抗體，不需要純化即可應用于日常診斷或定性研究。如果用于免疫標記測定，須分離和純化。可用半飽和、飽和硫酸銨進行沉淀，進行初步濃縮和純化；可用親和層析法進一步純化。一、腹水型單抗的純化在單抗純化之前，一般均需對腹水進行預處理，目的是為了進一步除去細胞及其殘渣、小顆粒物質、以及脂肪滴等。常用的方法有二氧化硅吸附法和過濾離心法，以前者處理效果為佳，而且操作簡便。1、二氧化硅吸附法新鮮采集的腹水（或凍存的腹水），2000r/min15分...

常見的融合蛋白表達標簽——總結

在重組蛋白中，常常將目的蛋白N端或C端與其他特定蛋白、多肽或寡肽標簽進行融合表達，形成既能保留天然蛋白的大部分結構，又能實現增溶，防降解，促進分泌，便于純化的功能；本文簡要介紹生物藥研發生產過程中常見的融合蛋白標簽；一、純化標簽His標簽His標簽是當前流行的標簽蛋白。His標簽是指六個組氨酸殘基組成的融合標簽，可插入在目的蛋白的C末端或N末端。當某一個標簽的使用，一是能構成表位利于檢測；二是構成*的結構特征（結合配體）利于純化。其特點可總結為以下幾點：1.標簽的分子量小，只...

技術服務 抗體測序服務

艾柏森生物科技有限公司作為值得信賴的抗體研發服務供應商，擁有專業的技術團隊，可為客戶提供的抗體測序服務。艾柏森生物打造的全新一代抗體測序平臺，基于蔦槍法與抗體數據庫相結合的技術“DatabaseAssistedShotgunSequencing”（DASS）技術，這項技術還適用于其他亞型和不同形式的抗體，如：IGM，熒光偶聯抗體，固定化抗體，不同物種的抗體等。等重氨基酸測序與其它基于MS測序方法不同的是，我們可以分辨大多數等重氨基酸復合物★W可與GE、AD、SV區分★R可從G...

技術服務 X-射線晶體學

技術介紹：X-射線分辨單克隆抗體-抗原復合物是分析單克隆抗體識別表位的可靠方法，該方法基于對單克隆抗體-抗原共晶體衍射的X-射線束的強度和角度測量，再用生物信息學的方法確定原子坐標，將復合體的三維結構完整可視化。抗原表位分析對抗體人源化改造，抗體親和力提高，抗體穩定性改造，發現新的功能表位，改變抗體特異性，設計新抗體，基于抗原－抗體相互作用的立體構型設計新型功能分子改造抗體都很重要。應用該方法首先需獲得純度較高的抗原、抗體，并使其相互作用形成共晶，但由于成本及技術要求較高，難...

技術服務 酵母雙雜交篩選服務

蛋白的酵母雙雜交實驗是以酵母的遺傳分析為基礎，研究蛋白間相互作用的一種有效技術手段。轉錄活化蛋白可以和DNA上特異的序列結合而啟動相應基因的轉錄反應。這種DNA結合與轉錄激活的功能是由其上兩個相互獨立的結構域，即DNA結合結構域(BindingDomain,BD)和轉錄活化結構域(ActivationDomain,AD)共同完成的。以Gal4系統為例，BD和AD分別由Gal4蛋白上不同的兩個結構域(1-147aa與768-881aa)構成。在利用GAL4系統篩選cDNA文庫或...